毛囊干细胞储存液及其制备方法

毛囊是表皮向真皮凹陷后形成的能控制毛发生长的皮肤附属结构，是由胚胎期神经外胚层与问充质相互作用，最终发育形成的由多层细胞组成的、具有合成多种特异角质蛋白功能的复杂的动态器官。在哺乳动物的一生中，毛囊反复周期性地经历着生长期、退行期和休止期的变化，并通过周期性的生长，显示出完全的自我再生能力。毛囊是一个复杂的皮肤衍生结构，虽然相关研究在体外诱导取得了一些进展，但准确的说还是毛囊样细胞结构，不是真正的毛囊。因此目前现有的体外模型还未能诱导出具备完整生理功能的毛囊，也不适宜作为模拟胚胎期毛囊发育与分化和研究毛囊生长周期信号调控的通用体外生物模型。

华炬新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项毛囊干细胞储存液及其制备方法，该技术相对于现有技术的有益效果：该毛囊干细胞储存液在利用利用贴壁法分离毛囊外根鞘细胞，在完全培养液中，4～5天便可见毛囊外根鞘边缘向外游离生长出单个细胞，培养一周左右即可明显看到大量细胞从外根鞘边缘生长出来，其中混杂有上皮样形态细胞(细胞呈圆形，随后伸展成多角形，似鹅卵石状)毛囊细胞分离培养与鉴定及毛囊体外重塑研究和成纤维形态细胞；随着游离生长细胞的增多，生长速率逐渐加快，在第15天左右时，细胞进入对数生长期。此时完全培养液更换为工作培养液，上皮样形态细胞(ORSC)依然保持快速的生长速率和旺盛的增殖活性，而成纤维形态细胞生长受到明显抑制，随着传代培养的进行，上皮样形态细胞(ORSC)形成优势细胞群，在倒置相差显微镜下观察，可见毛囊外根鞘细胞排列紧密规则，细胞饱满，透明度高，胞核圆形，胞质较少。当细胞传至5代以上时，其增殖活性开始降低，个别细胞出现空泡化、凋亡等现象，此时将工作培养液更换为维持培养液，ORSC逐渐恢复良好的生长与增殖活力，随后多数细胞向四周呈克隆状生长，胞体延长，向外伸出2～4个片足，形成致密单层后细胞由上皮样形态变化为短梭状平行排列，现将该毛囊干细胞储存液及其制备方法及实施例介绍如下供研究参考：（471311  425308）

该项目由华炬新产品研究所技术咨询委员会多位专家根据目前国内该领域最新技术推荐的新技术、新产品、新工艺，
包括技术工艺、技术创新、技术配方、方法步骤及实例等方面的推荐，供同仁参考交流，
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